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顎下腺導管系の分化における遺伝子発現の研究

フォーマット:
論文
責任表示:
井関, 尚一 ; Iseki, Shoichi
言語:
日本語
出版情報:
2007-05
著者名:
掲載情報:
平成18(2006)年度 科学研究費補助金 基盤研究(C) 研究成果報告書 = 2006 Fiscal Year Final Research Report
巻:
2005-2006
開始ページ:
6p.
バージョン:
author
概要:
1)ラット舌下腺に発現する新規蛋白質:ラットの舌下腺に特異的に発現する遺伝子をクローニングし、その産物への抗体を作成した。この蛋白質は動物L型レクチンの一種であるヒトERGLとホモロジーを有する膜蛋白質であり、Sublingual acinar membrane protein(SLAMP)と名付けた。SLAMPは舌下腺の腺房細胞において主に小胞体-ゴルジ中間区画(ERGIC)の膜に局在し、粘液成分の形成や愉送、分泌に関与することが示唆された(論文1)。2)短期間、低予算での ラットポリクローナル抗体作成法の開発:抗原蛋白質のcDNAの一部を合成し、細菌に導入してオリゴペプチドを産生させ、これをラット足蹠に注射し、約3週間で抗血清を得る方法を開発した。マウスのERGIC-53は、小胞体からERGICへの小胞性輸送に関与する膜蛋白質である。今回の方法でつくった抗ERGIC-53ラット抗体によりマウス舌下腺細胞のERGICが染色されることから、SLAMPの役割が推測された(論文2)。3)アンドロゲンにより発現を抑制される顎下腺の新規蛋白質:遺伝子サブトラクション法により、新規の顎下腺蛋白質の遺伝子を同定した。この蛋白質のmRNA発現は顎下腺では雄より雌で36倍高く、逆に涙腺では雌より雄で28倍高かった。また精巣切除マウスや雌マウスにアンドロゲンを投与すると、顎下腺では顕著に発現が抑制され、逆に涙腺では顕著に促進されたため、この蛋白質をSubmandibular androglen-repressed protein(SMARP)と名づけた。SMARPのmRNAと蛋白質は顎下腺および涙腺の腺房細胞に局在した。異なる器官でアンドロゲンにより反対の発現制御を受ける遺伝子は、アンドロゲンによる遺伝子発現制御機構の解明に寄与すると思われた(論文3)。<br />1)A novel protein expressed in rat sublingual gland : We cloned a novel rat gene expressed primarily in the sublingual gland and named the predicted 503 amino-acid protein SLAMP (sublingual acinar membrane protein). SLAMP had 63% homology with human ERGIC-53-like protein, a member of the family of animal L-type lectins. SLAMP mRNA and protein were expressed predominantly in the mucous acinar cells of sublingual gland. Ultrastructurally, SLAMP was localized to the ER-Golgi intermediate compartment (ERGIC), suggesting that SLAMP functions in the early secretory pathway of glycoproteins. 2)A new method of producing rat polyclonal antibodies with shorter time and lower cost: Producing antibodies usually takes a long time. We developed a new method of producing polyclonal antibodies in less than a month, based on preparation of the recombinant oligopeptides as antigen followed by immunization of rats. Using this method, we produced antisera against ERGIC-53 and confirmed its localization in the ERGIC. 3)A novel submandibular androgen-repressed protein of the mouse: We characterized a cDNA clone derived from the female mouse submandibular gland (SMG). The protein product of this clone had a 165-amino acid protein with a putative signal sequence and was named submandibular androgen-repressed protein (SMARP). In the mouse SMARP mRNA was expressed only in the SMG and exorbital lacrimal gland (LG). The level of SMARP mRNA was 36 times higher in female than male SMG, whereas it was 28 times higher in male than female LG. Furthermore, it was reduced in SMG but increased in LG after administration of testosterone to females or castrated males. SMARP mRNA and protein were predominantly localized in acinar cells in both SMG and lacrimal gland. These results suggested that SMARP is a secretory protein whose expression is regulated by androgens negatively in the SMG and positively in the LG.<br />研究課題/領域番号:17590154, 研究期間(年度):2005-2006<br />研究機関: 金沢大学医学系研究科<br />出典:「顎下腺導管系の分化における遺伝子発現の研究」研究成果報告書 課題番号17590154 (KAKEN:科学研究費助成事業データベース(国立情報学研究所))   本文データは著者版報告書より作成 続きを見る
URL:
http://hdl.handle.net/2297/00048956
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