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Watanabe, Masaki ; Hoso, Masahiro ; Takemura, Keiju ; Yoshikubo, Hiroaki ; Matsuzaki, Taro ; Kojima, Satoshi
概要:
金沢大学医薬保健研究域保健学系<br />To reveal the changes of joint formation due to contracture we studied the histopathological change
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s using an exterior fixation model of the rat knee joint. Twenty Wistar male rats of 9-weeks of age had their right hind legs fixed in plaster a posture of maximum knee joint flexion. Four rats each were grouped into 2, 4, 8, 16 and 32 weeks fixation and their knee joints were observed under an optical microscope with hematoxylin-eosin staining. In the group of 2 weeks fixation, we recognized atrophy and fiber outgrowth of fat tissues surrounding the joint and those changes developed along with prolongation of fixation. Adhesion of the arthrodial cartilage to adjacent tissues was obsereved in the group of 4 weeks fixation. From the groups after 16 weeks fixation, there were examples of the cnemis and femur connecting with tissues. After long term plaster fixation of 32 weeks, the whole joint formation had developed atrophy, fibrination and narrowing articular cavity leading to tissue ankylosis. Inflammation and cartilage necrosis or disappearance were not observed. 要旨: 拘縮時に生じる関節構成体の変化を明らかにするため，ラット膝関節の外固定モデルを用いて，その病理組織学的変化を観察した。9週齢のWistar系雄ラット20匹の右後肢を膝関節最大屈曲位にてギプス固定し，4匹ずつ2，4，8，16，32週固定群をそれぞれ作成し，ヘマトキシリン・エオジン染色を行い光学顕微鏡下にて観察した。固定2週群から関節周囲脂肪織の萎縮と線維増生を認め，固定期間の延長と共にそれらの変化は進行した。関節軟骨と周囲組織との癒着が固定4週群から観察された。固定16週群以降では，脛骨，大腿骨が線維性に連結する例が見られた。32週に渡る長期ギプス固定により，関節構成体の萎縮，線維化，関節腔の狭小化が進行し，線維性強直に至った。炎症や軟骨の壊死，消失は観察されなかった。
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井関, 尚一 ; Iseki, Shoichi
概要:
哺乳動物のほとんどの組織に分子量15kDa前後の細胞質可溶性蛋白質が存在し、脂肪酸との結合能があるため脂肪酸結合蛋白質(FABP)と呼ばれる。FABPは近似配列をもつ多数の分子種からなるファミリーを形成し、組織特異的に異なる型の蛋白質が発現
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している。このうち最近新潟大学小野輝夫博士の研究室でラット小腸上皮から分離された新しいFABPである腸15kDa蛋白質(I-15P)について、ラット組織における発現と局在を詳細に検討した。まずラット小腸からI-15PのcDNAをクローニングし、塩基配列を決定した。この配列の一部に相補的な合成DNAをプローブとして、in situハイブリダイゼーション法によりラット全身におけるI-15PのmRNA発現部位を検索し、同時に抗I-15P抗体(小野博士提供)を用いた免疫組織化学により、I-15Pの組織内・細胞内局在を光顕および電顕レベルで解析した。免疫反応性およびmRNAシグナルとも、小腸のうち特に回腸の吸収上皮細胞に局在した。電顕的には反応性は主に細胞質基質に局在した。そのほか、副腎のステロイド産生細胞の一部と、卵巣の黄体細胞にも免疫反応およびmRNAシグナルが局在した。以上の結果は、I-15Pが回腸吸収上皮細胞による胆汁酸吸収に関与する可能性とともに、一部のステロイド性内分秘細胞のホルモン代謝に関与する可能性を示唆した。卵巣ではI-15P以外に別のタイプのFABPとして心臓型FABP(H-FABP)が発現している。卵巣の生後発達および排卵過程におけるH-FABPとI-15Pの免疫反応性の発現を調べたところ、I-15Pの反応は生後2週から3週にかけて一過性に卵胞膜・間質腺細胞の一部に陽性となった後に4週でいったん消失し、排卵開始する5週以後には黄体細胞に局在した。未成熟ラットにゴナドトロピンを投与して排卵を誘導すると、胞状卵胞の顆粒膜細胞に、その黄体化にともなって次第に強くI-15Pが発現した。一方、H-FABPの反応は生後3日から2週にかけて一過性に卵胞上皮細胞に陽性で、2週以降成獣にいたるまでは常に卵胞膜・間質腺細胞に局在した。以上の結果は、2種のFABPがラット卵巣の異なる細胞種に発現し、それぞれ特異的なステロイド産生に関与する可能性を示唆した。<br />A family of homologous, low-molecular-weight cytosolic proteins with high affinity for fatty acidsis expressed in mammalian tissues and called fatty acid-binding protein (FABP). Rat small intestine is knownto express several distinct FABPs, including newly-discovered intestinal 15 kDa protein (1-15P). We studied the expresion and localization of I-15P in the entire rat body, using the immunocytochemistry to localize protein and in situ hybridization to localize mRNA.Both techniques demonstrated the expression of I-15P in the enterocytes of ileum, luteal cells of ovary and a subpopulation of steroid-endocrine cells of adrenal gland. Immuno-electron microscopy further demonstrated that I-15P is localized in both the cytoplasmic and nuclear matrix regions of above cells. These results suggested the roles of I-15P not only in the transport of bile salts by ileal epithelium but also in the metabolisms of certain steroid hormones. Next, the immuohistohemical localizations of two types of FABPs, i.e., I-15P and heart FABP (H-FABP), were examined in the developing rat overies and in the rat overies induced to ovulate by gonadotropins. In the postnatal development of ovary, I-15P-immunoreactivity was localized temporarilyin a small subpopulation of theca/interstitial cells from 2 weeks to 4 weeks and then in the luteal cells from 5 weeks, in coincidence with the onset of cycles, into adulthood. In the immature (3 week old) ovaries inducedto ovulate by treatment with pregnant mare serum gonadotropin and human chorionic gonadotropin, I-15P-immunoreactivity first appeard in the luteinizing granulosa cells of large preovulatory follicles. In contrast, H-FABP-immunoreactivity was present temporarily in the follicular epithelial (granulosa) cells during the initial 2 weeks and thereafter in the theca/interstitial cells from 2 weeks postpartum into adulthood. These results suggested that two types of FABPs are expressed in distinct steroid cell populations of rat ovary, implecatin.<br />研究課題/領域番号:04670009, 研究期間(年度):1992-1993<br />研究機関: 金沢大学医学部<br />出典：「小腸上皮における脂肪酸結合蛋白ファミリーの発現と局在の研究」研究成果報告書 課題番号04670009(KAKEN：科学研究費助成事業データベース（国立情報学研究所）) 本文データは著者版報告書より作成
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井関, 尚一 ; Iseki, Shoichi
概要:
タフト細胞(以下、最近の用語として刷子細胞とする)はヒトを含む哺乳動物の内胚葉由来の上皮に散在する特殊な細胞種であるが、その本態については不明の点が多かった。本研究で代表者らはラットの肝蔵型脂肪酸結合蛋白(L‐FABP)への抗体が刷子細胞を
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特異的に免疫染色することを発見し、これをマ-カ-として利用し、ラット消化器系における刷子細胞についていくつかの新しい所見を見いだした。刷子細胞が高頻度に見つかったのは胃および総胆管であった。胃においては噴門部上皮に集合的に、また胃体部および幽門部の表層および胃小〓に散在性に刷子細胞が存在し、すべてLーFABP陽性であった。形態的には、すべての刷子細胞が基底部に細い細胞質突起を有し、そこには何らの分泌果粒も存在しないことが確認された。ラットの個体発生において、刷子細胞は既に生後0日の胃にLーFABP陽性を有して存在し、最初の2週間の乳飲みの時期が終了した後の生後3、4週のうちに急激にその数を増すことがわかった。総胆管の上皮においては、走査電顕の観察により形態学的に認められる刷子細胞は生後4週間でやっと出現したが、LーFABP免疫陰性であった。刷子細胞の頻度は雄性ラットでは第8週から12週にかけて、雌では約2週間遅れて第10週から14週にかけて急激に増加し、性差が見られたが、両性とも生後16週以後、全上皮細胞の約30%に達して一定となった。一方、LーFABP陽性の刷子細胞は生後8週で初めて出現し、16週以後除々に増加したが、40週の時点でも全総胆管刷子細胞の約25%ほどの陽性率であった。本研究は特異的なマ-カ-の使用により、刷子細胞の分布、形態、発生の詳細を明らかにしたのみならず、脂肪酸の吸収・代謝に関与するとされるLーFABPの刷子細胞での発現を示して、この細胞種の機能の解明に糸口を与えた。<br />The brush cell, also referred to as the tuft cell, is a rare cell type known to occur in the endoderm-derived epithelia of many mammalian species. In the present study, we found that an antibody against Liver-type Fatty Acid-Binding Protein (L-FABP) specifically immunostained the gastrointestinal brush cells of the rat, and utilized this immunoreactivity as a specific marker of the brush cell to elucidate its previously unclarified aspects.The largest populations of brush cells were found in the stomach and common bile duct. In the stomach, brush cells were present in a group in the groove of cardiac region as well as scattered singly in the surface and foveolar epithelia of the fundic and pyloric regions, with intense immunoreactivity for L-FABP. Morphologically, it was clarified that all brush cells had a thin basal cytoplasmic process without secretory granules. In the ontogeny of rats, brush cells first occurred in the new born stomach, with immunoreactivity for L-FABP, and increas ed remarkably in number within the few weeks following the end of the first 2 weeks of sackling period.In the common bile duct, The brush cells as recognized by scanning electron microscopy first appeared in the epithelium at 4 weeks after birth. They showed a remarkable increase in number between 8 and 16 weeks and finally occupied about 30 % of the total epithelial cell population of common bile duct. The initial development of brush cells in the females delayed for approximately 2 weeks from that of males. On the other hand, the L-FABP-immunoreactive brush cells first appeared only after 8 weeks postpartum. They showed a gradual increase in number after 16 weeks but reached only about 25 % of the total brush cell population by the time of 40 weeks.The present study, by virtue of the specific histochemical marker, provided new findings concerning the distribution, morphology and ontogeny of the brush cell. Also, the expression of L-FABP in the brush cell may shed light on the functional aspect of this cell type in relation to the fatty acid meTabolism.<br />研究課題/領域番号:01570006, 研究期間(年度):1989-1990<br />研究機関: 金沢大学医学部<br />出典：「消化管タフト細胞の形態,発生,動態,機能の全容: 組織化学的研究」研究成果報告書 課題番号01570006 (KAKEN：科学研究費助成事業データベース（国立情報学研究所）) 本文データは著者版報告書より作成
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論文 |
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小野口, 昌久 ; Onoguchi, Masahisa
概要:
心筋血流製剤における肝臓,肺臓および腸管の集積が画像から算出した心筋摂取率に及ぼす影響を検討するために,^<99m>Tc-tetrofosminを投与したラットをガンマカメラでプラナー像(以下,PI)で撮像し,画像から得られた各臓器の摂取率
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と,摘出臓器(心臓,肺臓,肝臓,血液および腸管)をウェル型シンチレーションカウンタ(以下,WC)で測定した摂取率の値を経時的に比較した。WCによる心臓摂取率は,投与30分後(1.671%±0.306%)まで増加し,その後緩やかに減少した。一方,PIによる摂取率は,投与15分後(1.814%±0.518%)に最大値となり,両者の差は投与10分後(PI/WC比:約1.6)に最大となった。WCによる肺摂取率は投与15分後(0.870%±0.312%)から次第に減少したが,PIによる摂取率は10分後(1.139%±0.376%)で高値を示し,その後ほとんど変化を認めなかった。またWCによる肝臓摂取率は投与5分後(0.768%±0.193%)から30分後(0.692%±0.273%)までほとんど変化を認めず,その後次第に減少したが,PIによる摂取率はWCに比し,10分後(1.949%±0.596%,PI/WC比:約3.3倍),15分後(1.845%±0.642%,PI/WC比:約2.3倍)で高値を示した。WCによる心臓/臓器比はいずれも経時的に増加したが,PIでは経時的変化が少なく,低値であった。PIによる十二指腸と上部小腸の摂取率は投与後10分(1.228%±0.602%,2.245%±1.936%)で最大となり,各腸管壁とその内容物の摂取率の割合は,十二指腸,小腸ともに90%以上が肝臓から排泄された内容物によるものであった。以上より,心臓,肺臓,肝臓の摂取率は,いずれもWCによる値に比べPIでは有意に高値を示した。特に投与後早期で両者の差は大となり,投与10分後では,PIによる心臓の摂取率とWCによる摂取率との間に大きな乖離がみられた。PIから算出された摂取率は必ずしも真の値を正確に表しておらず,心臓に隣接する肝臓,腸管などの高集積による散乱線の関与が大きいと思われた。<br />It's reported that the duodenum and the small intestine of the activity excreted from the liver and gallbladder can lead to interference with the myocardial uptake. To study how precisely images reflect tracer uptake in a myocardium, as fundamental experiment to examine the influence that accumulation of the liver and alimentary tract (except esophagus) of the activity excreted from the liver gave to the myocardium image in the technetium-99m myocardium perfusion tracer, we administered ^<99m>Tc-tetrofosmin (following, Tetrofosmin) to a normal rat and compared with measured value obtained by a gamma camera and an actual survey value after the organs extraction. Methods : Thirty-three rats were measured for 5, 10, 15, 30, 45, 60, 90 and 120min after the administration of Tetrofosmin. The accumulated rates for the myocardium, the lung, the liver, the duodenum, the small intestine, the rectum and the blood with a well-type scintillation counter (WC) were assessed as a percentage of t he injected dose per gram of tissue (%ID/g). The accumulated rates for each organ with the planar imaging (PI) were assessed as a percentage of the injected dose per pixel (%ID/pixel) establishing regions of interest (ROIs) in each organ. The accumulated rates for each organ, the PI-to-WC ratio and the heart-to-organ ratios calculated by PI and WC were compared. Results : The accumulated rate for the heart with WC increased until 30 min (1.671%±0.306%) after the injection, and subsequently decreased. On the other hand, peak of the accumulated rate with PI was shown at 15 min (1.814%±0.518%) after the injection. Particularly a difference of both was higher in 10 min (PI/WC ratio : about 1.6 times) of the early phase. The accumulated rate for the lung with WC was maximum at 15 min (0.870%±0.312%) after the injection. The accumulated rate with PI, however, showed the maximum value at 10 min (1.139%±0.376%), and a variation of the accumulated rate was hardly recognized 10 min later. The accumulated rate for the liver with WC was hardly shown a marked variance from 5min (0.768%±0.193%) to 30min (0.692%±0.273%), and a tendency of decrease was showed slowly. On the other hand, the accumulated rate with PI was more highly than that with WC in the whole, and high values were showed in 10 min (PI/WC ratio : about 3.3 times) and 15 min (PI/WC ratio : about 2.3 times) in particular. The accumulated rate for the duodenum and the upper small intestine was maximum in 10 min (1.228%±0.602%, 2.245%±1.936%) after the injection, and approximately 90% of ^<99m>Tc-tetrofosmin were the duodenum excrements. Conclusion : The accumulated rates for each organ with PI were showed higher than that with WC. The difference of both, particularly, was stronger in early phase after the injection. The accumulated rate for the heart with PI was shown significant higher than that with WC at 10 min. The interference of Compton scatter from the liver, duodenum and small intestine was suggested as one of these causes.<br />研究課題/領域番号:10670836, 研究期間(年度):1998-1999<br />出典：「核医学的手法による動物モデルを用いた臓器血流の定量化の研究: γ線の吸収散乱因子」研究成果報告書 課題番号10670836 (KAKEN：科学研究費助成事業データベース（国立情報学研究所）) 本文データは著者版報告書より作成
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