1.

図書

図書
Yokoyama, Shigeru
出版情報: The Sciatic Nerve: Blocks, Injuries and Regeneration.  pp.185-207,  2011-01-01.  Nova Science Publishers
URL: http://hdl.handle.net/2297/37022
概要: Inflammatory cytokines play important roles in a variety of pathophysiological changes associated with traumatic injury and demyelinating disorders in the peripheral nervous system. After sciatic nerve injury, proinflammatory cytokines such as interleukin 1β (IL-1β), interleukin-6 (IL-6) and tumor necrosis factor-α (TNFα) are produced by and act on neurons, Schwann cells, and infiltrating inflammatory cells at the lesion site. Underlying these processes is receptor-mediated activation of intracellular signaling pathways that regulate cell differentiation and proliferation and synthesis of axon and myelin components. This review focuses on roles of inflammatory cytokines in the degeneration and regeneration of the peripheral nerve. In addition, we describe here altered expression of inflammatory cytokines in gradually elongated rat sciatic nerves. This experimental model, which is devoid of Wallerian degeneration, provides insights into the involvement of inflammatory cytokines in the maintenance of myelinated axons. Based on the findings obtained from nerve elongation models and those from conventional nerve injury models, we discuss the molecular mechanism that ensures the integrity of the peripheral nerve. © 2011 by Nova Science Publishers, Inc. All rights reserved. 続きを見る
2.

論文

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Department of Immunobiology ; Takahashi, Morinobu ; Sakai, Shunnosuke ; Nonaka, Masaru ; Amano, Shigetoyo ; Lai, Jing Erh ; Huang, Zhu Mig ; Miyagishi, Michiko ; Nakano, Yoriko ; Asahi, Toshiaki ; Nakayama, Kohzo ; Yu, Dae Yeul ; Yokoyama, Shigeru ; Sa-nga, Pattanakitsakul
出版情報: 金沢大学がん研究所年報 = Cancer Research Institute Report.  pp.45-50,  1988-03-25.  金沢大学がん研究所 Cancer Research Institute, Kanazawa University / 金沢大学
URL: http://hdl.handle.net/2297/34466
3.

論文

論文
横山, 茂 ; Yokoyama, Shigeru
出版情報: 平成29(2017)年度 科学研究費補助金 挑戦的萌芽研究 研究成果報告書.  2015-04-01 - 2018-03-31  pp.4p.-,  2018-06-05.  金沢大学子どものこころの発達研究センター
URL: http://hdl.handle.net/2297/00054863
概要: 神経伝達物質受容体、イオンチャネルに代表される疎水性膜タンパクは、自己免疫性精神神経疾患の標的抗原となることが知られている。その診断検出システムを開発するために血自己抗原膜タンパクを大腸菌に大量発現させた。今回、グルタミン酸受容体サブユニッ ト2種 (GluN1-1, GRIA2)と神経型アセチルコリン受容体サブユニット (nAChR-alpha7)の大腸菌大量発現を達成した。ナノファイバーに組み込むための溶媒の検討を行い、ファイバー化に適した条件を模索している。<br />研究課題/領域番号:15K15190, 研究期間(年度):2015-04-01 - 2018-03-31 続きを見る
4.

その他

その他
横山, 茂 ; Yokoyama, Shigeru
出版情報: 金沢大学十全医学会雑誌 = Journal of the Juzen Medical Society.  126  pp.116-116,  2017-11.  金沢大学十全医学会 — The Juzen Medical Society Kanazawa University
URL: http://hdl.handle.net/2297/00050419
5.

論文

論文
横山, 茂 ; Yokoyama, Shigeru
出版情報: 平成26(2014)年度 科学研究費補助金 基盤研究(C) 研究成果報告書.  2012-04-01 – 2015-03-31  pp.4p.-,  2015-05-27.  金沢大学子どものこころの発達研究センター
URL: http://hdl.handle.net/2297/00049437
概要: ラットの坐骨神経切断部および脊髄損傷受傷部位において、糖タンパクGpnmb(glycoproteinnon-metastatic melanomab)の発現上昇が認められた。免疫組織染色を行ったところ、損傷部位近傍のGpnmb免疫反応陽性細 胞の少なくとも一部は、ED1、OX6、あるいはOX42陽性であった。Gpnmbはマクロファージあるいはミクログリアで産生され、末梢および中枢神経系の損傷に伴う病態変化に関与することが示唆された。<br />研究課題/領域番号:24590724, 研究期間(年度):2012-04-01 – 2015-03-31 続きを見る
6.

論文

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横山, 茂 ; Yokoyama, Shigeru
出版情報: 平成23(2011)年度 科学研究費補助金 基盤研究(C) 研究成果報告書 = 2011 Fiscal Year Final Research Report.  2009-2011  pp.6p.-,  2012-05-08.  金沢大学医学系
URL: http://hdl.handle.net/2297/00049438
概要: ラット坐骨神経切断時に細胞外に放出されることが推測される分子を探索し、その候補として糖タンパクnmb(Glycoprotein non-metastatic melanoma B : Gpnmb)を同定した。Gpnmbは坐骨神経切断端に浸潤 するマクロファージに検出された。さらに、正常ラットの脊髄後角I、II層のミクログリア細胞にも存在した。これらの結果から、Gpnmbは痛み情報伝達の調節に関与することが示唆された。<br />We explored genes whose protein products were assumed to be released into the extracellular space after axotomy of rat sciatic nerve, and identified glycoprotein non-metastatic melanoma B(Gpnmb) as a candidate. Gpnmb expression was detected in infiltrating macrophages in the nerve ends. Also, Gpnmb was expressed in microglia in the layers I and II of the spinal dorsal horn of normal rats. These results suggest that Gpnmb might be involved in the modulation of pain transduction.<br />研究課題/領域番号:21600002, 研究期間(年度):2009-2011 続きを見る
7.

論文

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横山, 茂 ; Yokoyama, Shigeru
出版情報: 平成17(2005)年度 科学研究費補助金 基盤研究(C) 研究成果報告書 = 2005 Fiscal Year Final Research Report Summary.  2003-2005  pp.11p.-,  2007-05-07.  金沢大学医学系研究科
URL: http://hdl.handle.net/2297/00049439
概要: 抗カリウムチャネル(Kv1.1、Kv1.2)抗体を作製し、末梢神経系での局在を調べた。その結果、これらのチャネルはk筋および皮膚に分布する非侵害性感覚受容ニューロンに優位に発現していた。また、神経損傷後にKv1.2チャネルの発現低下が見られ た。これらの結果から、Kv1.2チャネルの神経損傷時の発現低下が、非痛覚(触覚、振動覚、温度覚等)ニューロンと二次痛覚ニューロンとの異所性シナプスの形成と相侯って、痛覚過敏、アロディニアで観察されるような過剰膜興奮を来たす可能性が示唆された。末梢神経の損傷および損傷前段階で誘導される因子を同定するために、成体ラットの坐骨神経を延長した。伸長速度が1.0、2.0、20.0mm/日の3群に分け、いずれも合計20.0mmまで伸長した。腰部脊髄後根神経節および坐骨神経からRNAを抽出し、インターロイキン1β(IL1β)、インターロイキン6(IL6)、腫瘍壊死因子α(TNFα)、神経成長因子(NGF)、脳由来神経栄養因子(BDNF)、ニューロトロフィン3(NT-3)、ニューロトロフィン4/5(NT-4/5)のmRNAの発現量をRT-PCRによって調べた。腰部脊髄後根神経節では、IL6のmRNA量が顕著に上昇し、TNFα、NGF、BDNF、NT-3、NT-4/5のmRNA量に変化は認められなかった。また、坐骨神経では、TNFαのmRNA量が上昇し、IL1β、IL6、NGF、BDNF、NT-3、NT-4/5のmRNA量に変化は認められなかった。これらの発現上昇は、Waller変性が認められない1.0、2.0mm/日群でも有意であった。IL6、TNFαは、神経損傷時にニューロン、シュワン細胞で誘導される主要な因子であると想定された。今後、IL6およびTNFαが膜電位依存性チャネル(特にKv1.1とKv1.2)の発現量を変化させるかどうか調べる予定である。<br />Kvl.1 and Kv1.2 are closely related pore-forming subunits of voltage-gated potassium (K+) channels, and are abundantly expressed in the peripheral nervous system. To clarify biological roles of these subunits in primary sensory afferentiation, we performed immunohistochemical analysis using specific polyclonal antidodies. In immunopeoxidase staining, dorsal root and trigeminal ganglia revealed that intense immunoreactivity (IR) for Kvl.1 and Kv1.2 was prediominant in medium to large cell bodies of primary sensory neurons. Double-immunofluorescence experiments revealed that the strongly immunoreactive neurons were most frequently RT97 (neurofilament)-positive; but rarely peripherin-or IB4-positive. In the spinad dorsal horn, both the anti-Kvl.1 and anti-Kv1.2 antibodies heavily stained the deeper laminae III-IV. These results suggest that voltage-gated channels composed of Kvl.1 and/or Kv1.2 subunits may play important roles in conducting mechanoceptive and proprioceptive sensation from skin and muscles. We also observed that, when sciatic nerve was ligated, Kv1.2-IR was reduced in DRG neurons. We now hypothesize that activities of particular subtypes of K+ channels are reduced after peripheral nerve injury, resulting in abnormal excitability of primary sensory neurons, (manuscript, in preparation) In pararell, we attempted to identify proteins unregulated after peripheral nerve perturbation. We demonstrated that sciatic nerve elongation induces production of interleukin-6 (IL-6) in DRG neurons and tumor necrosis factor-alpha (TNF-α) in Schwann cells. The induction was detected not only in the acutely elongated 20-mm/d group, in which nuclear eccentricity in the cell body and degenerated axons were observed, but also in the gradually elongated 1-and 2-mm/d groups, in which no degenerative change was detectable. These data indicate that the expression levels of IL-6 and TNF-α are regulated delicately in the peripheral nervous system. (Osamura, et al., Exp. Neurol. 191: 61-70, 2005; Hagiwara et al., J. Orthop. Sci.10: 614-621, 2005) In the future, we will examine whether or not IL-6 and TNF-α alter expression levels of Kvl.1 and Kv1.2 proteins in neuropathic pain models.<br />研究課題/領域番号:15500255, 研究期間(年度):2003-2005 続きを見る
8.

論文

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横山, 茂 ; Yokoyama, Shigeru
出版情報: 平成14(2002)年度 科学研究費補助金 基盤研究(C) 研究成果報告書 = 2002 Fiscal Year Final Research Report Summary.  1999-2002  pp.4p.-,  2003-05.  金沢大学大学院医学系研究科
URL: http://hdl.handle.net/2297/00049440
概要: 研究経過・結果は以下の通りである。1.ラット膜電位依存性カリウムチャネルの構成サブユニット(Kv1.1とKv1.2)のアミノ酸配列にもとずく合成ペプチドをウサギに免疫し、抗血清を抗原ペプチド結合カラムクロマトグラフィーによって精製した。2. 上記抗体を用いてKv1.1あるいはKv1.2の相補DNAを導入したCOS-7細胞で特異的な免疫染色が認められた。いずれの抗体でも、ラット小脳膜分画を用いたウエスタンブロット解析において、特異的なバンドを検出された。3.ラット腰部脊髄後根神経節と三叉神経節を酵素抗体法によって染色したところ、Kv1.1あるいはKv1.2の免疫反応性は中型から大型の神経細胞体で観察された。これらの細胞体の50%以上はニューロフィラメント(RT97)陽性であった。ペリフェリンと同時陽性の細胞は僅かであった。4.脊髄後角では、Kv1.1、Kv1.2の免疫反応性は深部III-IV層で顕著であった。5.ヒラメ筋では、Kv1.1およびKv1.2の免疫反応性が螺旋状の構造物に認められ、抗ニューロフィラメント抗体にも反応性を示したことから感覚ニューロンの末梢側受容体であることが示唆された。6.下肢皮下への蛍光標識金コロイド注入後に標識されるL4後根神経節内の細胞体の一部はKv1.1あるいはKv1.2陽性であり、皮膚感覚ニューロンの少なくとも一部にこれらのチャネルが発現していることが示された。7.坐骨神経切断後の腰部脊髄後根神経節でKv1.1およびKv1.2の免疫反応性の低下が認められた。したがって、生理的状態でKv.1.1、Kv1.2チャネルは筋および皮膚に分布する非侵害性感覚受容ニューロンにおける活動電位の大きさ、頻度、伝播等を調節していると示唆された。同時に、これらのチャネルの発現低下は神経損傷後の痛覚過敏、アロディニアの一因となる可能性が推測された。<br />Kv1.1 and Kv1.2, two most closely related members of the Shaker-like gene subfamily, encode pore-forming subuaits of voltage-gated potassium (K^+) channels. To clarify physiological roles of these proteins in primary sensory afferentiation, we have performed inimunohistochemical analysis using specific antidodies. Immunoperoxidase staining of dorsal root and trigeminal ganglia revealed that strong immunoreactivity (IR) for Kv1.1 and Kv1.2 was predominant in medium- and large-sized neurons. In double-immunofluorescence experiments, the cells strongly positive for these subunits were most frequently observed in RT97 (neurofilament)-positive large neurons; but rarely in peripherin- or IB4-positive small neurons. In the spinal dorsal horn, both the aati-Kv1.1 and anti-Kv1.2 antibodies heavily staiaed the deeper laminae III-IV. At the electron microscopic level, IRs for these proteins were preferentially localized in myelinated axons with large diameter. These results suggest that voltage-gated K^+ channels composed of Kv 1.1 and/or Kv 1.2 subunits may play important roles in conducting mechanoceptive and proprioceptiye sensation from skin and muscles. Conceivably, decreased expression of these channels after injury might cause hypereexcitability of neurons, thereby leading to hyperalgegia or allodyaia.<br />研究課題/領域番号:11680753, 研究期間(年度):1999-2002 続きを見る
9.

論文

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Ito, Takaaki ; Ikeda, Kazuo ; Tomita, Katsuro ; Yokoyama, Shigeru
出版情報: Neuroscience Letters.  472  pp.104-108,  2010-03-19.  Elsevier
URL: http://hdl.handle.net/2297/21587
概要: 金沢大学医薬保健研究域医学系<br />The interleukin-6 (IL-6) family of cytokines is thought to be involved in the development and regeneration of peripheral nerves; however, their roles in myelination remain unclear. In this study, we examined the effects of IL-6 on the expression of genes for compact myelin proteins using Schwann cell cultures prepared by multiple explantation of adult rat sciatic nerves. In semi-quantitative reverse transcription-polymerase chain reaction analysis, stimulation of Schwann cells with IL-6 significantly increased the mRNA level of peripheral myelin protein 22 (PMP22), but not those of myelin protein zero and myelin basic protein. The increase in PMP22 mRNA was markedly suppressed by AG490, a Janus kinase 2 (JAK2) inhibitor, but not significantly by PD098059, a mitogen-activated protein kinase inhibitor. Immunocytochemical staining revealed that IL-6 enhanced immunoreactivities for the phosphorylated forms of both JAK2 and signal transducer and activator of transcription 3 (STAT3), as well as that for PMP22. These results indicate that IL-6 can enhance PMP22 production in Schwann cells via a JAK2-dependent pathway by probably activating STAT3 and thus may contribute to myelination. © 2010 Elsevier Ireland Ltd. All rights reserved. 続きを見る
10.

論文

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Higashida, Haruhiro ; Salmina, Alla ; Hashii, Minako ; Yokoyama, Shigeru ; Zhang, Jia-Sheng ; Noda, Mami ; Zhong, Zen-Guo
出版情報: FEBS Letters.  580  pp.4857-4860,  2006-09-01.  Elsevier
URL: http://hdl.handle.net/2297/2807
概要: 金沢大学大学院医学系研究科脳細胞分子学<br />ADP-ribosyl cyclase activity in the crude membrane fraction of neuroblastoma × glio ma NGPM1-27 hybrid cells was measured by monitoring [3H] cyclic ADP-ribose (cADPR) formation from [3H] NAD+. Bradykinin (BK) at 100 nM increased ADP-ribosyl cyclase activity by about 2.5-fold. Application of 300 nM BK to living NGPM1-27 cells decreased NAD+ to 78% of the prestimulation level at 30 s. In contrast, intracellular cADPR concentrations were increased by 2-3-fold during the period from 30 to 120 s after the same treatment. Our results suggest that cADPR is one of the second messengers downstream of B2 BK receptors. © 2006 Federation of European Biochemical Societies. 続きを見る