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Kimura, Takako ; Jyo, Michiko ; Nakamura, Norio ; Komatsu, Katsuko ; Hattori, Masao ; Shimotohno, Kumiko ; Shimotohno, Kunitada ; Kakiuchi, Nobuko
概要:
金沢大学医薬保健研究域薬学系<br />民族薬物からの新たな抗ウイルス薬の開発を目指して,我々はチベット伝統薬物76種のHIVの逆転写酵素(RTase)およびHCVのRNA依存RNAポリメラーゼ(RbRp)に対する阻害効果を検討した。これら
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76種のメタノールエキスのうち28検体が100μg/mlの濃度でRTaseに70%以上の阻害効果を示したが、タンニンの効果を排除するためBSA添加後ら効果があったものはこのうち3検体のみであった。一方,同濃度でRdRpに90%以上阻害効果があり,またタンニンの含有率が10%以下のものは8検体であった。さらにRTaseに対するIC_<50>が5.9μg/mlであった薬物のRhodiola sacraのメタノールエキスの分画を行い8イヒ合物を単離した。そのうちdaucosterolにRTase阻害作用を見い出した。For the purpose of development of novel anti-virus agents from ethnical drugs, we examined 76 traditional Tibetan medicines for inhibitory effect on two viral enzymes, reverse transcriptase (RTase) of HIV and RNA dependent RNA polymerase (RdRp) of HCV. Although 28 methanol extracts inhibited RTase more than 70 % at a concentration of 100 μg/ml, only 3 samples, T42 (藏青果, Termlnalia chebula RETZ.), T46 (檳榔, Areca catechu L.) and T61 (紅檳榔), were found still inhibitory after eliminating the effect of tannins by addition of BSA in the enzyme reaction mixture. In the case of the RdRp, 7 extracts with IC_<50> values of less than 10 μg/ml contained less than 20 % tannins. The extract of Rhodiola sacra, whose IC_<50> for RTase was 25.9 μg/ml, was subject to phytochemical investigation. Out of 8 compounds isolated from the extract, daucosterol was found effective for RTase.
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Tanimoto, Tomoaki ; Cuong, Nguyen Hung ; Ishizaki, Azumi ; Chung, Phan Thi Thu ; Huyen, Hoang Thi Thanh ; Trung, Nguyen Vu ; Kageyama, Seiji ; Oka, Shinichi ; Thuc, Pham Van ; Ichimura, Hiroshi
概要:
金沢大学医薬保健研究域医学系<br />To identify hepatitis C virus (HCV) transmission routes among injection drug users in Northern Vietn
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am, plasma samples were collected from 486 drug users in Hai Phong. Plasma viral RNA was extracted from 323 (66.5%) samples that were positive for anti-HCV antibodies. Portions of the HCV 5′- untranslated (5′UTR)-Core and NS5B genes were amplified by reverse-transcriptase polymerase chain reaction, sequenced directly, and genotyped in 194 and 195 specimens, respectively. Both regions were genotyped in 137 specimens. In the 5′UTR-Core region, genotype 6a was predominant (32.5%), followed by genotype 1a (23.7%), genotype 1b (20.6%), and genotype 6e (14.4%). In the NS5B region, genotype 1a was predominant (42.6%), followed by genotype 1b (24.1%), genotype 6a (14.4%), genotype 3b (7.2%), and genotype 6e (5.1%). Of the 137 specimens with both regions genotyped, 23 (16.8%) showed discordant genotyping results between the two regions, suggesting possible recombination and/or dual infection. Phylogenetic analysis revealed close associations between Hai Phong strains and strains from Southern China: the Yunnan province for genotype 3b; the Guangxi province for genotype 6e; the USA for genotype 1a; and Southern Vietnam for genotypes 1a and 6e. The human immunodeficiency virus (HIV) infection rate among HCV-infected injection drug users was 52.6-55.4% and did not differ significantly by HCV genotype. Most drug users infected with HIV-1 [98.8% (171/173)] were co-infected with HCV. These results suggest multiple routes of HCV transmission among injection drug users in Northern Vietnam that may also be HIV transmission routes. © 2010 Wiley-Liss, Inc.
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畢, 袖晴 ; Bi, Xiuqiong
概要:
金沢大学医薬保健研究域医学系<br />本研究では、ベトナムのヒト免疫不全ウイルス（HIV）感染小児において、抗HIV療法(ART)が小児の免疫活性化、Th1/Th2/Th17/Tregのバランスに及ぼす影響を横断的並びに経時的に調べた。横
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断的調査では、ART導入後、CD4細胞数、Th2/Th17/Treg細胞数、およびCD4/CD8比は徐々に上昇し、正常化までに4.8-8.3年を要したが、Th17細胞数とCD8細胞の活性化状態は1年以内に正常化した。経時的調査でARTによる早期（１年以内）のTh1細胞数とCD8細胞活性化状態の正常化が確認された。また、CD4/CD8比はARTモニタリングに有用なマーカーであることが示唆された。<br />This study aimed to investigate the impact of ART on the immune status of HIV-infected Vietnamese children. The peripheral CD4 cells, their subsets Th1/Th2/Th17/Treg, and CD8 cell activation were analyzed cross-sectionally and longitudinally.Cross-sectional study revealed that after ART initiation, the total CD4 cell and Th2/Th17/Treg subset counts and the CD4/CD8 ratio gradually increased, with estimated ART periods of normalization being 4.8-8.3 years, whereas Th1 counts and the CD8 cell activation status normalized within 1 year of ART. Longitudinal study confirmed the rapid Th1 recovery and early CD8 cell activation normalization after ART initiation. The CD4/CD8 ratio could be an additional marker for ART monitoring.<br />研究課題/領域番号:26461572, 研究期間(年度):2014-04-01 - 2017-03-31
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景山, 誠二 ; Kageyama, Seiji
概要:
日本のHIV流行阻止のために,隣国フィリピンの流行阻止は重要であるが,これらの低流行国で入手可能な少数のHIV解析に依存した流行様式の解析・流行阻止は困難である.そこで,HIVが性行為感染者よりも先に注射薬物使用者(IDU)に流行の端緒が作
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られることに着目し,血液を媒介にIDUに侵入するHCVを代用マーカーとして「流行の核」を早期に発見する試みを始めた.ルソン,ビサヤ,ミンダナオの主要な都市圏に監視地域を得た.総検査数は,IDU由来1494検体を含む,2645検体に達した.HIV抗体陽性事例は3検体であり,フィリピンのHIVの低流行を裏付けた.しかし,注射薬物使用や透析によるHCV感染の頻度は高く,セブ都市圏の市街地居住のIDUにみられるHIV感染比率がわずかに0.40%であるのに比べ,抗HCV抗体陽性比率は89%である.また,HCV株(ルソン,48株;ビサヤ,366株,ミンダナオ,30株)について検討したところ,株の多様性は,マニラ首都圏を含むルソン地域に高く,特に,Subtype-1b(n=11),4(n=1),6(n=1)はこの地域にしかみられない.また,マニラ首都圏の株には,当地由来・その他の地域由来の何れの株よりも外国株に類似の株が存在する.このように,マニラ首都圏は,最も外国の影響を受けやすいことが示唆された.一方,系統樹解析から,Subtype-1a群には,上記3地域の株が混在しており,HCV株は3地域の間を短期間に移動していることも示唆された.ミンダナオの株(n=30)は全てSubtype-1aであり,多様性は低く,海路による南方からの血液媒介感染経路の存在は確認されていない.HIVがHCVと同様の経路で侵入・伝播すると仮定する場合,血液を媒介に流行するHIVは,マニラ首都圏から侵入し,短期間の内にセブ都市圏やミンダナオ地域に広がることが推測された.<br />The monitoring of an HIV infection is important for the prevention of an outbreak. However, it is difficult to identify the early phase of an epidemic only by HIV monitoring and we add the monitoring of Hepatitis C virus (HCV) to be used for a surrogate marker of blood-borne IIN infection. Blood-borne HIV infections have been considered to be the spread measures at initial phase of an outbreak before sexual contact-related infections.Surveillance areas have been organized in Luzon, Visaya, and Mindanao in the Philippines, and totally 2,645 samples have been tested including 1,494 ones from injecting drug users (IDUs). HIV has been rarely detected, which supports the low prevalence of HIV infection in the Philippines. However, the blood-borne HCV infections are prevalent among IDUs and dialysis patients. The percentage of HCV infections among IDUs at downtown in Metro Cebu (the center of Visaya) were 8936 although that of HIV was few, 0.40%. The profiles of HCV indicated that the variety of the strains prevalent in Metro Manila (capital of the Philippines and the center of Luzon) has been biggest Subtype-1b, genotype-4 and 6 were only observed in Metro Manila Moreover, some of them strains bad higher homology to foreign strains than those prevalent in Metro Manila. The strains variety may indicate that the foreign strains may preferentially enter into Metro Manila than other areas. Some strains collected in three areas (shown above) mixed together in the Phylogenetic trees, suggesting HCV stains may circulate quickly in the Philippines.The results of HCV study indicate that WV may enter into Metro Manila and circulate into other area in the Philippines.<br />研究課題/領域番号:16406014, 研究期間(年度):2004-2007<br />出典：「フィリピンのHIV流行阻止のためのハイリスク集団把握と流行経路予測の試み」研究成果報告書 課題番号16406014 (KAKEN：科学研究費助成事業データベース（国立情報学研究所）) 本文データは著者版報告書より作成
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畢, 袖晴 ; Bi, Xiuqiong
概要:
金沢大学医薬保健研究域医学系<br />本研究は長期ART(antiretroviral therapy)が小児の免疫状態に及ぼす影響の解明を目的とした。ART導入後、小児のCD4-RTE/-naive/-cm/-em とTh1 サブセット
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, CD8-naive/-cm サブセットは6ヶ月までに非感染児の正常レベルに上昇した。他のCD4とCD8細胞のサブセット、Th2/Th17/Treg、CD8細胞の活性化、CD4/CD8比はART後1-4年目までに正常化した。ARTによりHIV感染小児の胸腺機能は早期に回復したが、CD4/CD8比の正常化には４年必要であった。ART前の年齢は小さいほどART後6ヶ月のCD4細胞増加数が多かった。<br />This study investigated the impact of ART on the immune status of HIV-infected Vietnamese children. The differentiation of CD4 and CD8 cells, Th1/Th2/Th17/Treg subsets, and CD8 T cell activation were analyzed twice a year and compared to those of HIV-uninfected children.After ART initiation, the CD4 cell counts including the CD4-RTE (recent thymic emigrants)/-naive/-cm (central memory)/-em (effector memory) and Th1 subsets, and the CD8-naive/-cm subset counts significantly increased and reached the HIV(─) children’s range by 6 months. The CD4-emra (emCD45RA+) and Th2/Th17/Treg, the activated CD8 cells, the CD8-em/-emra subsets, the CD4/CD8 ratio normalized within 4 years. The younger children showed better increase of CD4 counts at 6 months of ART. ART induced an early recovery of thymic function in HIV-infected children and lead to the early recovery of CD4 and CD8 naive subsets. Early diagnose of HIV infection followed by early ART is important for HIV administration in children.<br />研究課題/領域番号:17K10100, 研究期間(年度):2017-04-01 - 2020-03-31<br />出典：「長期抗HIV療法が小児免疫状態に及ぼす影響」研究成果報告書 課題番号17K10100（KAKEN：科学研究費助成事業データベース（国立情報学研究所））（https://kaken.nii.ac.jp/report/KAKENHI-PROJECT-17K10100/17K10100seika/)を加工して作成
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大野, 博司 ; Ohno, Hiroshi
概要:
金沢大学がん進展制御研究所<br />Nefの発現は細胞内構築を変化させることが知られている。われわれはNefがACTE-III(アシルCoAチオエステラーゼIII)と結合し、その活性を増強することを見い出した。そこで、ACTE-IIIを強
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発現した細胞を作成したところ、電顕においてペルオキシソームの減少、脂肪滴の出現、およびミトコンドリアの形態異常が認められた。ACTE-IIIはペルオキシソームに局在し、脂肪酸代謝に重要な働きをすると考えられることから、この形態変化はACTE-IIIを強発現したことによると考えられる。また、ACTE-III強発現細胞では正常細胞に比べ増殖抑制が認められた。ACTE-IIIは上記のようにペルオキシソームに局在するがNefは細胞質に存在すると考えられることから、今後は、この細胞にNefを共発現させることにより、ACTE-IIIの細胞内局在が変化するか否か、さらに細胞内微小構造がどのように変化するかを検討することにより、HIV感染細胞の病理におけるNefとACTE-IIIとの相互作用の果たす役割を検討したい。Envに関しては、AP-2複合体のμ2鎖と結合してエンドサイトーシスされること、また、マトリックス蛋白が存在するとEnvのエンドサイトーシスが阻害され、細胞表面への発現が増加することから、マトリックス蛋白がAP-2とEnvの結合を競合阻害すると考えられる。そこでその可能性を検討するために、IL-2受容体α鎖(Tac)とgp41envの細胞質領域とのキメラ蛋白(TE-11)を安定に発現したHeLa細胞株を作成した。今後はこの細胞を用いてマトリックス蛋白を強発現させ、μ2との結合を阻害する結果、TE-11の細胞表面への発現が増強するか調べる。<br />研究課題/領域番号:11161202, 研究期間(年度):1999<br />出典：「HIV NefおよびEnv蛋白に結合する細胞性因子の研究」研究成果報告書 課題番号11161202（KAKEN：科学研究費助成事業データベース（国立情報学研究所））（https://kaken.nii.ac.jp/ja/grant/KAKENHI-PROJECT-11161202/)を加工して作成
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