1.

論文

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中西, 猛夫
出版情報: 金沢大学がん進展制御研究所 共同研究成果報告書.  平成24年度  pp.79-80,  2013-04-01.  金沢大学がん進展制御研究所 = Cancer Research Institute of Kanazawa University
URL: http://hdl.handle.net/2297/41850
概要: DHEASを基質として輸送する有機アニオントランスポーター(OATP)がアンドロゲン枯渇下の前立腺癌細胞増殖において果たす役割を明らかにすることを目的として検討をした。アンドロゲン枯渇下で培養されたヒトアンドロゲン受容体陽性前立腺癌細胞LN CaPや22Rv1細胞において、OATP1A2の発現が顕著に増大した。発現が増大したOATP1A2によりアンドロゲン枯渇下では血中濃度が変動しないDHEAS(不活性型)が細胞へ取り込まれ、細胞内のsteroid sulfataseによりDHEAやDHTなどアンドロゲン(活性型)へ代謝されて利用され、アンドロゲン枯渇下でもその細胞増殖能が維持されることが初めて明らかになった。本研究成果は前立腺癌のCRPCへの進行において、OATPがアンドロゲンの前駆体としてDHEASの供給に寄与し、細胞増殖に維持する役割を担うと考えられた。 続きを見る
2.

論文

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溝上, 敦 ; Mizokami, Atsushi
出版情報: 平成23(2011)年度 科学研究費補助金 基盤研究(C) 研究成果報告書 = 2011 Fiscal Year Final Research Report.  2009-2011  pp.4p.-,  2012-04-11.  金沢大学附属病院
URL: http://hdl.handle.net/2297/47534
概要: 我々は、前立腺癌の増殖に影響を与えている遺伝子の中で、アンドロゲン受容体の感受性にも影響を与える遺伝子の同定を試みた。前立腺針生検で得られた数名ずつの前立腺癌組織と正常組織を用いたcDNA microarrayによる遺伝子発現プロファイルを 比較し、それらの遺伝子の中で癌患者において約6倍発現の亢進しているCAMKK2に焦点を当てた。CAMKK2はアンドロゲン感受性前立腺癌細胞株LNCaPにおいて、DHTにより発現が誘導された。前立腺組織の免疫組織染色およびin vitroにおいての研究により、CAMKK2は癌抑制遺伝子として機能していた。<br />We tried identification to affect the androgen receptor sensitivity in the gene which affected the proliferation of the prostate cancer. We compared a gene expression profile by cDNA microarray which we used a normal tissue for with the prostate cancer tissue by several obtained by prostatic needle biopsy. Then we focused on CAMKK2 which the approximately 6 times expression enhanced in patients with cancer in those genes. As for CAMKK2, expression was induced in androgen-sensitive prostate cancer cell line LNCaP by DHT. In immunohistochemical staining of the prostatic tissue and in vitro study, CAMKK2 functioned as antioncogene.<br />研究課題/領域番号:21592037, 研究期間(年度):2009–2011 続きを見る
3.

論文

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並木, 幹夫 ; Namiki, Mikio
出版情報: 平成13(2001)年度 科学研究費補助金 基盤研究(B) 研究成果報告書 = 2001 Fiscal Year Final Research Report.  2000-2001  pp.7p.-,  2002-03. 
URL: http://hdl.handle.net/2297/00048967
概要: 本研究では,申請者らがクローニングしたhTERTのプロモーター領域(1375bP)を利用して,遺伝子治療の基礎的検討を行った.平成12年度においては,プロモーターのマッピングや活性調節因子の解析などを行った.10種類のdeletion mu tantを用いて,各種細胞株におけるプロモーター活性をLuciferase assay法を用いて解析した.その結果,転写開始点から378bp上流までの領域は,コントロールとして用いたSV40プロモーターの約80%の活性を示した.次にこの活性領域の脱メチル化を行い,抑制されていたp16やE-cadherinの発現がメチレーションの関与を受けていることを確認した.さらにPCR-based methylation assayにて,脱メチル化による発現であることを証明した.自殺遺伝子治療に用いられるCD遺伝子を378bpプロモーター下流につなぎ,各種ヒト癌細胞株を用いてin vitro実験を行った結果,コントロールとして用いた正常上皮細胞や線維芽細胞では殺細胞効果は認められなかったが、癌細胞株では泌尿器癌だけでなく婦人科癌においても高い殺細胞効果が認められた.さらなる活性増強を目的に、現在この378bpプロモーターをタンデムリピートし,同様の手法で検討中である.平成13年度においては,in vivoでの治療実験を行うため378bPプロモーター+CDをアデノウィルスベクタに組み入れた.予備実験として,ex vivoでアデノウィルスによりCD遺伝子を導入した前立腺癌細胞を、SCIDマウスに同所移植後5FCを腹腔内投与した.その結果明かな腫瘍縮少効果が認められた.今後このアデノウィルスベクターをマウス尾静脈から投与し,in vivoでの治療実験を行う予定であるが,上記実験から明かなように,hTERTプロモーターは幅広い癌腫で活性を示すと考えられ,高い抗腫瘍効果が各種癌種で得られるものと期待している.<br />Human telomerase reverse transcriptase (hTERT) is the catalytic subunit of telomerase, which is highly active in immortalized cells. We herein carried out basic experiments on cancer gene therapy utilizing the hTERT promoter. The core promoter region was identified by deletion analysis, and demethylation of this region accelerated the expression of p16 and E-cadherin. Cytosine deaminase gene was ligated in downstream of hTERT promoter. In vitro experiments demonstrated that cell- kill effect was only seen in cancer cells not in normal cells. Tandem repeat promoter is now under construction for creating more active and specific tool in gene therapy. Adenovirus vector containing hTERT promoter and CD was constructed, and used in vivo experiments. The data was promising and could be widely utilized in the field of cancer gene therapy because of its specificity.<br />研究課題/領域番号:12470330, 研究期間(年度):2000-2001<br />研究機関: 金沢大学医学系研究科 続きを見る