アロマターゼ過剰発現を手がかりとした子宮筋腫の病因解明とその治療応用

フォーマット:

論文

責任表示:

生水, 真紀夫 ; Shozu, Makio

言語:

日本語

出版情報:

2003-09-16

著者名:

• 生水, 真紀夫
• Shozu, Makio

掲載情報:

平成13(2001)年度 科学研究費補助金 基盤研究(C) 研究概要 = 2001 Research Project Summary

巻:

1999 – 2000

開始ページ:

2p.

バージョン:

author

概要:

金沢大学医学部・附属病院<br />本研究の成果は、以下の4点に集約される。1.子宮筋腫組織ではエストロゲン合成酵素であるアロマターゼが、正常子宮筋と比較して10-20倍程度高いことを、1)mRNAレベル(合成RNAを内部標準とした定量的RT-PCR法)、2)蛋白レベル(ミクロソーム分画を用いたWestem blottingによる半定量法)、3)酵素活性(トリチウムラベルアンドロステンジオンを基質としてミクロソーム分画のトリチウム水産生速度を測定するいわゆるwat … er assay法)の3法により証明した。2.ついで、アロマターゼの発現細胞が子宮筋腫組織中のどの細胞であるかをに確認した。抗アロマターゼ抗体を用いた染色では子宮筋腫に高い免疫原性が証明された。また、子宮筋腫内に存在する動脈壁の線維細胞にも弱い抗原性が認められた。したがって、子宮筋腫細胞アロマターゼを発現していることが明らかとなった。3.そこで、アロマターゼにより産生されるエストロゲンの意義について検討した。子宮筋腫組織より酵素消化法により分離培養した初代培養細胞を用いて、1)生理的に存在するレベルのアンドロステンジオン(10^8M)から筋腫細胞自身がエストラジオールを産生すること、2)このエストラジオールにより自らの増殖が促進されること、3)このアンドロステンジオンの細胞増殖効果はアロマターゼインヒビターにより特異的に阻止されることが確認された。さらに、この細胞増殖効果はメデイウム中のエストラジオール濃度をほとんど上昇させることなく認められることから、オートクライン・パラクライン・イントラクライン効果によるものと推定された。4.子宮筋腫組織におけるアロマターゼの発現は、gonadotrophin releasing homone agonist(GnRHa)の術前投与により著明に減少することが明らかになった。GnRHa療法時にみられる子宮筋腫の速やかな退縮効果には、子宮筋腫におけるin situ estrogen合成の抑制効果も関与しているものと推定された。GnRHaのアロマターゼ抑制効果は、in vitroでも一部再現可能であったことから、GnRHaが子宮筋腫細胞に直接作用している可能性が考えられた。<br />In the this study we characterized in detail the expression of aromatase P450 in leiomyomas to determine the physiological and pathological role of in situ estrogen in the growth advantage of leiomyomas.1) We demonstrated over-expression of aromatase P450 in leiomyoma tissues in comparison to the surrounding myometrium by three different and complementary methods: The levels of aromatase P45O transcripts were quantitated by quantitative competitive RT-PCR The amount of protein was semi-quantitated by Western blot analysis using microsomal fractions of leiomyoma tissues. Enzyme activity was measured by tritiated water-releasing assay using microsomal fractions.2) To identify a cell type that express aromatase P450 in leiomyoma tissues, immunohistochemical analysis was performed on the tissue samples and the leiomyoma cells that were released and cultured from the fresh leiomyoma tissues. Strong immunoreactivity was localized in the cytoplasm of leiomyoma cells.3) To determine whether endogenous aromatase P450 plays a role in the growth promotion of leiomyoma cells, we evaluated the cell W growth of leiomyoma cells treated with various concentration o of estrogens as well as androgens using a WST-1 assay and thymidine incorporation assay. We confirmed mat leiomyoma cells per se synthesize estrogen, which promotes their growth via an autocrine/intracrine mechanism.4) The expression of aromatase P450 in leiomyoma tissues was profoundly suppressed by preoperative gonadotrophin releasing hormone (GnRH) agonist therapy. In vitro experiment indicated that GnRH agonist acted directly on the leiomyoma cells to reduce the expression of aromatase. This direct inhibitory action of GnRH agonist on in situ aromatase seems to contributes to the rapid regression of leiomyoma during GnRH agonist therapy.<br />研究課題/領域番号:11671602, 研究期間(年度):1999 – 2000<br />出典：「アロマターゼ過剰発現を手がかりとした子宮筋腫の病因解明とその治療応用」研究成果報告書　課題番号11671602（KAKEN：科学研究費助成事業データベース（国立情報学研究所）） （ https://kaken.nii.ac.jp/ja/grant/KAKENHI-PROJECT-11671602/ ）を加工して作成 続きを見る

URL:

http://hdl.handle.net/2297/00063961